Некоторые фитопатогенпые бактерии можно определять серологически. Для этого разработано множество методов, но ниже описаны только два наиболее часто употребляемых. Оба метода основаны на специфической реакции антиген — антитела, причем исследуемые бактерии играют роль антигена. Антисыворотку получают от соответствующих учреждений или готовят в лаборатории.

Наиболее широко распространена методика, основанная на реакции агглютинации. На обезжиренное предметное стекло наносят каплю слаборазбавленной суспензии определяемого микроорганизма и смешивают с каплей диагностической антисыворотки. Контролем служит смесь той же суспензии с нормальной сывороткой. Смешанные капли инкубируют 1—2 ч при 24 °C или (в зависимости от вида диагностируемой бактерии) при 30—37 °C, затем результаты определяют под стереомикроскопом. При положительной реакции в капле смеси образуются хлопья, при отрицательной видно равномерное помутнение.
Смесь бактериальной суспензии с нормальной сывороткой не должна давать хлопьев; если они появились, анализ необходимо повторить.

При реакции преципитации в качестве антигена действуют не целые бактериальные клетки, а только содержащиеся в них белки. Эту реакцию можно воспроизвести после соответствующей обработки клеток различными способами, например в пробирке или в агаре.
Методика постановки реакции в агаре сводится к следующему: 1% размолотого агара разводят калий-фосфатным буфером и добавляют 0,02% азида натрия. Горячий агар фильтруют через вату и по 15 мл разливают в чашки Петри диаметром 9 см. После застывания агара с помощью пробочного сверла диаметром 6 мм в каждой чашке вырезают по 5—6 лунок, располагая их крестообразно вокруг центральной лунки (рис. 23). Рекомендуется пользоваться при этом шаблоном, подкладывая его под каждую чашку. Расстояние между боковыми лунками и центральной должно составлять около 3 мм. В центральную лунку вносят антисыворотку, в периферические — подготовленные тест-препараты (антиген). Чтобы получить реакцию тест-организма с антисывороткой, в принципе достаточно одной пары лунок. Вместо них в агаре можно вырезать две бороздки и заполнить антисывороткой или суспензией обработанных бактериальных клеток.

Простейшая обработка бактериальных клеток, необходимая для приготовления тест-препаратов, состоит в добавлении капли насыщенного раствора фенола к 1 мл концентрированной суспензии бактерий (около 10в9 клеток/мл). Затем суспензию сильно продувают и вносят в лунки, предназначенные для антигена. Контролем служат лунки с нормальной сывороткой.
При положительной реакции через 24—48 ч между лунками с антисыворотками и соответствующими антигенами появляются узкие белые линии преципитации, хорошо видные при боковом освещении на темпом фоне.
Если такая же линия появляется в контроле, нужно повторить опыт или изменить методику обработки бактерий.

---

---

• Определение спорообразования
• Определение подвижности
• Окрашивание жгутиков
• Окрашивание по Граму
• Приготовление и окрашивание мазка
• Методы выделения бактерий
• Методы посева и культивирования
• Приготовление простых препаратов для обнаружения бактерий в растениях
• Приготовление питательных сред
• Стерилизация оборудования, питательных сред, растительного материала