Распознавание серотипов кристаллического белка токсина В. thuringiensis

20.06.2014

Трудно дать обзор многочисленных работ по серологии кристаллов, поскольку для изучения реакций преципитации применялись различные методы. Антисыворотки к целым кристаллам можно готовить стандартными способами. Некоторые исследователи использовали в качестве антигенов целые кристаллы, другие же применяли препараты растворенного кристалла. Пендлтон, Моррисон и Кукси использовали для получения антисывороток кроликов, а Кривьенчик и Ангус — морских свинок. Пендлтон и Моррисон обнаружили только одну главную линию преципитации на штамм растворенного кристалла, соединенного с гомологичной антисывороткой. Они пришли к выводу, что группы изолятов В. thuringiensis, различающиеся по жгутиковым антигенам и по эстеразам вегетативных клеток, можно подразделить далее на основе кристаллических антигенов. Де Баржак и Лекадэ высказали предположение, что, когда для иммунизации кроликов использовался в противоположность целым кристаллам белок кристалла, растворенного в щелочи, иммунные сыворотки реагировали с растворимым белком, давая увеличенное число линий преципитации. Этим можно объяснить то, что Пендлтон и Моррисон обнаружили только один антиген на каждый штамм кристалла, хотя Кукси, Кингхэм и Норрис (неопубликованные данные) выявили два главных антигена, применив антисыворотки с использованием белка кристалла и целых кристаллов изолята В. thuringiensis Маттеса. Указанное несоответствие можно объяснить тем, что Пендлтон и Моррисон использовали при растворении кристаллов для иммунодиффузии 0,05 н. NaOH (pH>12). Методом количественного иммунологического теста Кукси доказал, что при pH 12 и выше быстро утрачивается способность реагировать с антисывороткой, поэтому возможно, что Пендлтон и Моррисон смогли измерить только один антиген, наиболее устойчивый к действию щелочей, или антиген в самой высокой концентрации. Ho этот технический момент не ослабляет выводов из их работы. Кукси обнаружил в изоляте Маттеса В. thuringiensis два главных антигена, когда растворенный белок вступил в реакцию с гомологичной антисывороткой (рис. 12). При испытаниях методом двойной диффузии по Охтерлони была отмечена другая слабая линия, которая не всегда была заметна. Иногда, однако, можно было видеть, что обе отдельные линии состоят каждая из двух близко расположенных друг от друга; таким образом, общее число линий составляло пять. Это полностью совпадает с данными Кривьенчика и Ангуса, хотя они использовали для реакции с актисыворотками целые спорулирующие культуры, содержащие целые кристаллы, эмульгированные в кишечных выделениях гусениц (табл. 13).