Определение гуминовых кислот
29.08.2012
Применительно к разным угодьям одной и той же почвенной разности (например, по полям травопольного севооборота) описываемый метод позволяет судить о количестве новообразованных гуминовых кислот.
Для анализа из общего образца почвы берут среднюю пробу в 40- 50 г. В пробе при помощи лупы пинцетом тщательно отбирают корешки и полуразложившиеся остатки. Для отбора корешков можно пользоваться также стеклянной палочкой, наэлектризованной трением о шерстяную ткань; при этом необходимо следить, чтобы не удалялся мелкозем, что ведет к искажению результатов. При размельчении крупных комков почвы необходимо пользоваться пестиком с резиновым наконечником, так как фарфоровым пестиком сухие корешки сильно измельчаются. Очищенная от корешков почва измельчается и просеивается через сито с отверстиями в 0,25 мм.
Извлечение подвижных гуминовых кислот. Из подготовленной почвы на технических весах берут навеску в 5 г, помещают ее в коническую колбу на 250 мл, осторожно заливают 100 мл 0,1 н. раствора NaOH, приготовленного на воде, освобожденной от СO2.
Колбу плотно закрывают резиновой или корковой пробкой и слегка встряхивают (два-три раза) для полного и равномерного смачивания почвы. Затем колбу с содержимым оставляют на 15-16 час. в спокойном состоянии.
После 15-16-часового настаивания содержимое колбы целиком переносят на воронку с двойным простым бумажным фильтром диаметром 17 см. Первые мутные порции фильтрата можно отбросить или осторожно перенести на фильтр. Когда в приемной колбе накопится 60-70 мл прозрачного фильтрата, фильтрование прекращают, из общего объема фильтрата берут 50 мл жидкости и переносят в стакан на 100 мл.
Из этого раствора гуминовые кислоты осаждают прибавлением серной кислоты с таким расчетом, чтобы конечная концентрация примерно равнялась 0,1 н. Для этого к 50 мл 0,1 н. щелочного раствора достаточно прибавить 5-8 мл 1,0 н. раствора серной кислоты. Прибавляют кислоту небольшими порциями, так как избытка ее следует избегать. После прибавления серной кислоты стаканчики ставят на 1 час на горячую электрическую этернитовую плитку для полной коагуляции гуминовых кислот.
После охлаждения раствора производят фильтрование на маленькой воронке через простой фильтр (диаметр воронки 4-5 см, а фильтра 7 см), не взбалтывая осадка, осевшего на дно стаканчика, для чего кислый раствор при помощи стеклянной палочки сливают через фильтр; затем на этот же фильтр переносят осадок гуминовых кислот, который на фильтре дважды промывают 0,02 н. раствором серной кислоты. Фильтрат и промывные воды отбрасывают.
Растворение осадка гуминовых кислот на фильтре производят над мерной колбой емкостью 50 мл. Для этого на фильтр очень небольшими порциями приливают (лучше из маленькой промывалки) горячий 0,02 н. раствор NaOH. Раствор гуматов натрия стекает в мерную колбочку.
Стаканчик, из которого перенесен осадок на фильтр, необходимо несколько раз смыть горячим 0,02 н. раствором NaOH для растворения приставшего к стенкам осадка гуминовых кислот; этот раствор присоединяют к общему объему в мерной колбочке. Далее щелочной раствор гуминовых кислот после охлаждения доводят в колбочке дистиллированной водой до черты (50 мл).
На определение углерода берут две параллельные пробы по 20 мл (проба соответствует 1 г почвы) в эрленмейеровские колбы на 100 мл. Щелочной раствор нейтрализуют 0,1 н. раствором серной кислоты, прибавляя ее по каплям до помутнения, и затем на водяной бане высушивают досуха. После высушивания раствора в колбочку прибавляют немного прокаленной пемзы или почвы (для равномерного кипения) и определяют углерод по Тюрину.
Одновременно можно вести 8-10 определений подвижных гуминовых кислот. При дальнейшем навыке партию анализов можно увеличить. Анализ партии образцов продолжается 4-5 дней.
Расчеты, приготовление растворов и установка титров при определении углерода изложены выше, при описании метода определения гумуса почвы по Тюрину.
Реактивы: 1. 0,1 н. раствор NaOH • 4 г NaOH растворяют в 1 л дистиллированной воды. Вода должна быть предварительно освобождена от углекислоты 2-3-часовым кипячением. Концентрацию приготовленного раствора проверяют по 0,1 н. раствору серной кислоты. Раствор щелочи должен быть приготовлен точно 0,1 н. Для приготовления раствора удобно пользоваться фиксаналом.
2. 0,1 н. раствор серной кислоты - 2,7 мл серной кислоты (уд. веса 1,84) на 1 л воды.
3. 0,02 н. растворы NaOH и H2SO4. Растворы удобно готовить из фиксаналов (0,1 н.) разбавлением их в пять раз.
