Метод выделения цист по Мюллеру

26.06.2014

Метод, предложенный Мюллером для извлечения из почвы цист свекловичной нематоды, позволяет обрабатывать относительно большие количества почвы. Он представляет собой комбинацию просеивания с последующим центрифугированием (рис. 61).
Образец почвы объемом 100—150 г промывают через сито (1). Остаток на сите, цисты и частицы почвы размером более 100 мкм с помощью вибромешалки тщательно смешивают с 6 г каолина (3), смесь переносят в центрифужный стакан и центрифугируют 5 мин при 1800 g (4). Оседающие в первую очередь почвенные частицы и цисты покрываются затем каолином, что предупреждает их слив вместе с надосадочной жидкостью. Вращение сосуда при сливе позволяет смыть цисты, осевшие на стенках сосуда, и перенести их на сито с отверстиями 50 мкм (5). К осадку в центрифужном стакане добавляют раствор сахара (d=1,1), обрабатывают вибромешалкой (6) и центрифугируют 3 мин при 1800 g, отделяя частицы почв от цист. Плавающие в растворе сахара цисты сливают на сито с отверстиями 50 мкм (9) и промывают чистой водой для освобождения от остатков сахарного раствора (10).

Остаток, состоящий только из цист, переносят в пластмассовый стакан (11), в который введен валик цистодробителя. Высвобожденные личинки и яйца можно подсчитать под микроскопом.
Преимущество метода заключается в исключении длительного отделения вручную цист от огромного количества органических частиц почвы и в возможности быстрого количественного учета популяции нематод. Ошибка опыта не превышает 10%. В то же время для этого метода нужны мощная центрифуга, вибромешалка и цистодробитель.