07.11.2017
31.10.2017
21.10.2017
21.10.2017
21.10.2017
04.10.2017
04.10.2017
28.09.2017
01.09.2017
31.08.2017
Выделение моноспоровых линий на питательный субстрат
 26.06.2014

Этот процесс выделения моноспоровых линий применяется при работе с факультативными возбудителями болезней. Образовавшиеся на растениях спорокучки или плодовые тела, например пикниды, зрелые перитеции, переносят в автоклавированную водопроводную воду, получая суспензию спор. Для моноспоровых линий в дальнейшем необходимы предметные и покровные стекла, стеклянные кольца высотой 8—10 мм и диаметром 12—15 мм, стерилизованные 3 ч при 180 °C, а также треугольные флажки из фильтровальной бумаги длиной 10 н шириной 5 мм. Так как фильтровальная бумага при стерилизации в термостате теряет поглотительную способность, флажки целесообразно стерилизовать в закрытых чашках Петри, поместив их на 20 мин в автоклав при 120 °C. Наконец, нужны чашки Петри со стандартной питательной средой, пинцет, пишущая ручка с большим числом заостренных перьев, копировальный карандаш или стеклограф, а также вазелин и микроскоп.
Сначала готовят так называемую камеру Бёттхера — стеклянное кольцо, покрытое по краям вазелином и закрепленное на предметном стекле. Затем прокаленным пером наносят 9 (3x3) или 16 (4х4) капель суспензии на покровные стекла, помещают их каплями вниз на приготовленные стеклянные кольца и просматривают под микроскопом. Все капли, содержащие только одну спору исследуемого гриба, маркируют карандашом на покровном стекле. Затем по мере надобности отмеченные капли всасывают острым углом флажка, удерживаемого прокаленным пинцетом, и переносят в чашки Петри с питательной средой (рис. 38). При этом нужно следить за тем, чтобы угол флажка входил в питательную среду плоско, так как при слишком глубоком погружении гриб может развиваться очень плохо, а при поверхностном нанесении высыхает. Чашки инкубируют при 20 °C. Работа этим методом требует определенного навыка.
Еще одна возможность получения моноспоровых линий — это метод разведения по Коху.

Выделение моноспоровых линий на питательный субстрат