Окрашивание жгутиков

 26.06.2014

При диагностике бактерий ключевую роль играет форма жгутиков. Их расположение и число можно определить с помощью электронного микроскопа или специального окрашивания. Из-за особой сложности этого процесса разработаны различные способы окрашивания жгутиков. Почти всегда после фиксирования препарата проводят специальную обработку каким-нибудь протравливающим раствором (как правило, содержащим таннин), который вызывает набухание белка жгутиков. Лишь затем приступают к окрашиванию.
Из имеющихся методов в качестве примера приведен относительно простой, но широко применяющийся вариант окрашивания по Лейфсону. Для ознакомления с другими методами окрашивания, например по Пепплеру, Грею, Лёффлеру, можно обратиться к специальной литературе.
Для окрашивания жгутиков используют молодые культуры бактерий, развивавшиеся от 8 до 24 ч при температуре, оптимальной для данного вида (25, 28, 32 или 37 °C). На обезжиренное предметное стекло наносят тонкий мазок, затем на еще влажный препарат — каплю свежеприготовленного и отфильтрованного раствора следующего состава: 1,5%-ный NaCl — 20 мл, 3%-ный таннин — 20 мл, 1,2%нный спиртовой раствор парарозаанилина — 20 мл. Далее препарат подсушивают на воздухе.
Время окрашивания — 20—30 мин. Препараты просматривают с иммерсионными объективами (апохромат или ахромат 20X или 100X) при хорошем освещении. Вместо парарозаанилина можно использовать 1,2%-ный спиртовой раствор фуксина.