04.10.2017
04.10.2017
28.09.2017
01.09.2017
31.08.2017
08.08.2017
14.07.2017
06.07.2017
19.06.2017
19.06.2017
Методы выделения бактерий
 26.06.2014

Выделение бактерий из различных органов растений — листьев, корней, семян и др. — требует дифференцированного подхода. В любом случае растительный материал тщательно моют, затем поверхностно стерилизуют путем погружения на 1—2 мин в водный раствор NaOCl (1:3) или в 0,1%-ный раствор сулемы.

Выделение из пятен на листьях и стеблях

Пятна на листьях или части стебля с подозрением на бактериальное поражение вырезают острым дезинфицированным скальпелем или ножом, захватывая здоровую ткань, и измельчают. Maцерат наносят штрихами на агар в чашках. Если поражены проводящие сосуды, то для выделения следует выбирать именно те части, на которых появились первичные симптомы. Части стеблей в стерильных условиях расщепляют вдоль, отбирают сосудистые ткани, мацерируют их и высевают на среду штрихом. При исследовании мясистых стеблей или клубней бактерии можно выделить, раздавив образец между пальцами и высеяв отжатый сок штрихом.
Выделение из корней, клубней и опухолей

Из корней и клубней бактерии выделяют так же, как из пятен на листьях и стеблях. Для поверхностной стерилизации корни и клубни после тщательного мытья под сильной струей воды можно погрузить в спирт и затем обжечь. Пораженные ткани мацерируют и высевают штрихом в чашки с питательной средой.
Выделение этим методом бактерий из опухолей, особенно из крупных или одревесневших, часто не удается. Более успешной оказывается пересадка маленьких мягких кусочков опухолей в ткани травянистых тест-растений. С этой целью маленькие V-образно вырезанные кусочки опухоли осторожно пересаживают в продольный надрез в стебле тест-растения, так чтобы трансплантат был полностью закрыт его тканью. Растения помещают на 2—3 дня во влажную камеру. Через 2—4 недели на месте надреза вместо каллуса развивается опухоль. Маленький кусочек опухоли отрезают стерильным ножом, тщательно промывают проточной водой и растирают в ступке с небольшим количеством воды или питательного бульона. Мацерат высевают штрихом в чашки с питательным агаром.
Выделение из семян

Если возбудитель находится под оболочкой семян, его выделяют так же, как из пятен на листьях или стеблях. При поверхностной контаминации семян поверхностная стерилизация исключается, возбудителя выделяют путем мацерирования или предварительного накопления.