21.10.2017
21.10.2017
21.10.2017
04.10.2017
04.10.2017
28.09.2017
01.09.2017
31.08.2017
08.08.2017
14.07.2017
Радиальная иммунодиффузия (РИД-тест)
 26.06.2014

При радиальной иммунодиффузии антисыворотка смешивается с агаром, поэтому вирусы, диффундирующие в агар радиально, сразу же встречаются с антителами. Положительная реакция проявляется в виде белого более или менее широкого кольца вокруг лунки (рис. 13).
Для проведения анализа 3 г агара в 75 мл буферного раствора кипятят на водяной бане до получения прозрачного раствора (примерно 30 мин) и добавляют 50 мг азида натрия. В остывший до 50 °C раствор вводят 25 мл предварительно подогретой антисыворотки в соответствующем разбавлении, тщательно встряхивают и сразу разливают по 10 или 15 мл в подогретые чашки Петри диаметром 10 см, установленные на горизонтальной плоскости. После остывания агара вырезают лунки.

Радиальная иммунодиффузия (РИД-тест)

Сок исследуемых растений получают в ступке с добавлением буферного раствора и вносят в лунки. Уже через несколько часов (в зависимости от диагностируемого вируса и его концентрации) проводится оценка результатов в темном помещении с боковым освещением. При этой методике также целесообразно включать контрольные варианты для выявления возможных неспецифических реакций.
Тест радиальной иммунодиффузии пригоден не только для качественного, но и для количественного определения фитопатогенных вирусов, поскольку ширина кольца прямо пропорциональна концентрации вируса.
Примечание. Радиальную иммунодиффузию до сих пор успешно применяли для диагностики вируса шарки сливы и вирусов картофеля. Деградация, т. е. распад палочковидных вирусов на субъединицы, обеспечивается путем добавления пирролидина или пиридина. Для вирусов, поражающих картофель, 0,7 мл сока смешивают с 0,3 мл пиридина. Готовые для анализа чашки Петри, в которых можно проводить большое число отдельных тестов (от 80 до 100), поставляются специальными учреждениями. Это позволяет свести до минимума затраты труда на исследования.