04.10.2017
04.10.2017
28.09.2017
01.09.2017
31.08.2017
08.08.2017
14.07.2017
06.07.2017
19.06.2017
19.06.2017
Электронная микроскопия В. thuringiensis
 20.06.2014

Первый электронный микроснимок кристалла В. thuringiensis опубликовали Ханней и Фитц-Джеймс, показавшие, что параспоральное тельце представляет собой правильный бипирамидальный кристалл с поверхностной структурой в форме довольно грубой полосчатости, параллельной основной плоскости кристалла. Они использовали относительно грубый метод напыливания металлом, при котором разрешающая способность микроскопа по современным стандартам невысока, а повреждение кристаллов, несомненно, является причиной образования некоторых артефактов. Для изучения поверхностной структуры интактных кристаллов использовали более чувствительный метод углеродных реплик (отпечатков) и обнаружили большее число деталей, показывающих, что основная белковая единица кристалла представляет собой шар диаметром примерно 8,7 ммк.
Норрис и Уотсон изучали тонкие срезы спорулирующих клеток, содержащих кристаллы на разных стадиях развития. Они показали, что кристаллы В. thuringiensis var. alesti (серотип III) образовывались вне экзоспоры развивающегося спорангия, и иллюстрировали созревание и освобождение спор и кристаллов на более поздних стадиях развития микроорганизмов. На этих срезах детали внутреннего строения кристаллов не были видны, и пришлось затратить действительно много труда, прежде чем удалось различить какие-либо подробности внутреннего строения кристаллов на тонких срезах. Решающее значение имеет, по-видимому, применяемый метод фиксации и заливки кристаллов. Лучшие снимки внутреннего строения кристаллов, как свободных, так и заключенных в спорангии, удавалось получать при фиксации глутаровым альдегидом с осмием и заливке в аралдит по методу Люфта. Срезы окрашивали лимоннокислым свинцом и уксуснокислым уранилом. Интерпретации тонких срезов этого типа очень помогла фотооптическая система, описание которой приводит Норрис. На электронных микроснимках видны детали двух типов: реальные, представляющие структуры, фактически присутствующие в исследуемом материале, и бессистемные артефакты, возникающие в процессах фиксации, заливки и изготовления срезов. Если изготовить большое число копий негативов электронного микроснимка, изображающего строение кристаллической решетки, и наложить их друг на друга таким образом, чтобы субъединицы оказались вне фазы при множественном совмещении просветов решетки, то реально существующие детали при наложении будут подчеркивать друг друга, а бессистемные артефакты, наоборот, друг друга погашать, в результате чего яснее выявится фактическая структура. Пользуясь этим методом, Норрис исследовал кристаллы В. thuringiensis var. tolworthi (серотип IX) и обнаружил достаточно подтверждений правильного расположения субъединиц в кристалле.