01.09.2017
31.08.2017
08.08.2017
14.07.2017
06.07.2017
19.06.2017
19.06.2017
19.06.2017
15.06.2017
12.06.2017
Красители при определении патогенов
 20.06.2014

1. Гимза

Сухие мазки, фиксированные метиловым спиртом, окрашивают в течение 30—60 мин свежим раствором 1—2 капель концентрированного красителя в 1 мл дистиллированной воды. Затем их промывают в проточной воде и высушивают. Постоянные препараты можно монтировать в нейтральной среде (цедекс, эвпарал) под покровным стеклом. Иммерсионное масло, применяемое при световой микроскопии, нужно смыть с поверхности окрашенных мазков хлороформом. Предварительная обработка мазков в течение 8 мин 1 н. раствором HCl при 61—62°C и окраска их раствором Гимза позволяет видеть ядра в спорах простейших. Обработка мазков, содержащих полиэдры, 1%-ной HCl (80—100°C) или холодным 1%-ным NaOH и окраска раствором Гимза позволяет обнаруживать вирусные частицы внутри полиэдров.
2. Гематоксилин (железный)

В качестве протравы служит 4%-ный водный раствор железоаммонийных квасцов. Концентрированный краситель приготовляют, растворив 10 г гематоксилина (основного) в 100 см3 95%-ного этанола и добавляя 900 см3 Н2О. Мазки или срезы замачивают на 6—12 ч в протраве, промывают в воде, окрашивают в течение 4—6 ч и снова промывают водой. Дифференцируют протравой до получения темносерой окраски срезов и снова промывают 5 мин в проточной воде. При необходимости обработку повторяют. Для окрашивания белковых вирусных включений нужно предварительно обработать срезы 1%-ной HCl (80—100°С) или холодным 1%-ным NaOH и окрашивать, как описано выше.
3. Раствор метиленовой синей

0,1—1%-ный раствор в воде или в лактофеноле применяется для окрашивания грибов и нематод.
4. Негативная окраска тушью

Небольшую каплю туши размешивают в капле воды, содержащей ткани с микроспоридиями или схизогрегаринами, и накрывают покровным стеклом. В таком препарате можно видеть любые слизистые капсулы вокруг спор, панспоробласты и вегетативные стадии. После просмотра препарата можно снять покровное стекло и высушить материал в форме мазка, который можно фиксировать, чтобы окрашивать как нормальные мазки.
5. Окраска по Граму

После воздушной сушки мазок фиксируют жаром, затем на 1 мин заливают на сетке 1%-ным водным раствором кристаллвиолета и отмывают 5 с водой, промывают 1 мин в растворе Люголя, дифференцируют 2 мин в бане из пропилового спирта, держат 1 мин в 2%-ном водном растворе сафранина и 5 с промывают в водопроводной воде. Грамположительные тельца принимают темно-фиолетовую окраску; грамотрицательные — красную. Если реакция Грама используется как диагностический признак бактерий, то та часть колонии, из которой приготовляют мазки, должна находиться в состоянии активного роста, потому что по мере старения клеток реакция Грама нередко меняется. Колонии, возраст которых неизвестен, нужно пересеять, и сведения о возрасте колоний, из которых взят образец, записать вместе с результатом окрашивания по Граму.
6. Нейтральный красный (нейтральрот)

0,5—1%-ный раствор красителя в абсолютном этаноле за 10—15 мин окрашивает в зараженных экземплярах NR-тельца при риккетсиозных инфекциях.
7. Краситель Здродовского и Голиневича

Концентрированный карболовый фуксин представляет собой смесь 1 г основного фуксина, 5 г фенола, 10 мл этанола и 100 мл дистиллированной воды. Перед употреблением концентрированный раствор разводят из расчета 10—15 капель на 10 мл дважды дистиллированной воды или фосфатного буфера с pH 7,4.